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高效液相色谱法测定罗布麻茶中槲皮素的含量

发布人:铁观音-铭祥茶业---大红袍,金骏眉,银骏眉,正山小种,普洱茶www.tea878.com 浏览 次【字号 】 发布时间:2013年12月26日 打印本页

    

高效液相色谱法测定罗布麻茶中槲皮素的含量

摘要:槲皮素,又名栎精,槲皮黄素,溶于冰醋酸,碱性水溶液呈黄色,几乎不溶于水,乙醇溶液味很苦。可作为药品,具有较好的祛痰、止咳作用,并有一定的平喘作用。

  目的建立测定罗布麻茶中槲皮素含量的高效液相色谱方法。方法以甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50)为流动相;采用KromasilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);检测波长为371nm;柱温30℃。结果槲皮素线性范围为5.98~47.84g/mL,回归方程为A=7750.68C+1196.33(r=0.9997)。结论本方法可以准确测定罗布麻茶中槲皮素的含量。

  罗布麻茶为罗布麻ApocynumvenetumL.的叶经烘干粉碎制成的单方制剂,具有平肝安神、清热利水作用。临床用于肝阳眩晕、心悸失眠、浮肿尿少,高血压病,神经衰弱,肾炎浮肿。现已被《卫生部药品标准(中药成方制剂)》收载,该标准含量测定项下规定以芦丁为对照品,采用分光光度法测定。鉴于该含量测定方法操作比较繁琐、重现性差,因此选择芦丁水解苷元槲皮素作为罗布麻茶含量测定的控制成分。本试验报道高效液相色谱法测定罗布麻茶中槲皮素含量的方法学研究,结果表明,该方法简便、准确、重现性好,可以控制罗布麻的质量。

       1仪器与试剂岛津LC-10ADvp高效液相色谱仪,SPD-10Avp紫外检测器,HT-230A柱温箱;KromasilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);岛津UV-2401紫外分光光度计;SartoriusBP211D电子天平(准确到0.01mg)。槲皮素对照品(批号100081-200406,购自中国药品生物制品检定所)。甲醇为色谱纯,水为重蒸水,其余试剂均为分析纯。罗布麻茶样品(山东省百草药业有限公司提供)。

  2方法与结果2.1色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50)为流动相;检测波长为371nm;柱温30℃。理论塔板数按槲皮素峰计算应不低于4000。

  2.2对照品溶液的制备精密称取槲皮素对照品6.15mg,置于100mL量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,得对照品溶液(59.84g/mL)。

  2.3供试品溶液的制备取本品内容物(过3号筛)约0.5g,精密称定,置圆底烧瓶中,加甲醇-25%盐酸溶液(4∶1)20mL,加热回流1h,取出,放冷,滤过,将滤液转移至100mL量瓶中,加甲醇-25%盐酸溶液(4∶1)稀释至刻度,摇匀,即得。

  2.4线性关系考察分别精密吸取对照品溶液1、2、4、6、8mL,置于10mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,得对照品溶液1、2、3、4、5(浓度分别为5.98、11.97、23.94、35.90、47.84g/mL)。每份溶液进2针,记录峰面积,以峰面积为纵坐标,对照品浓度(g/mL)为横坐标,计算回归方程。得回归方程:A=7750.68C+1196.33(r=0.9997),线性范围为5.98~47.84g/mL。

  2.5稳定性试验取重复性试验中批号06040101的供试品溶液为稳定性试验考察对象,分别在0、1、2、4、6h进行,平均峰面积RSD=0.86%,结果表明供试品在8h内测定稳定。

  2.6精密度试验取批号为06040101的供试品溶液6份,按上述色谱条件测定峰面积,连续测定6次。平均峰面积为305797,RSD=0.85%(n=6)。

  2.7加样回收率试验取批号为06040101的样品9份,每份0.25g,精密称定,置于圆底烧瓶中,分别加入对照品适量,按“供试品溶液的制备”方法配制9份供试品溶液,每份溶液进2针,采用标准对照法依法测定,计算,结果平均加样回收率为98.25%,RSD=2.64%。表明本方法回收率良好。

  2.8样品测定结果3讨论槲皮素溶于甲醇、乙醇,微溶于水。本实验考察了不同提取溶剂和水解条件,结果表明,选择甲醇-25%盐酸(4∶1)溶液为提取溶剂,直接回流水解60min,对罗布麻茶中槲皮素提取效果好。对槲皮素甲醇溶液于200~400nm波长下扫描,结果最大吸收波长为371nm,因此,选用371nm作为检测波长,结果供试液中槲皮素与其它组分色谱峰得到较好的分离,灵敏度高和杂质干扰小,且空白试验无干扰,溶剂无干扰。本试验所用方法和色谱条件可作为罗布麻茶质量控制的含量测定方法。

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 安溪铁观音简介
  福建乌龙茶是我国闻名于世的十大名茶之一,而铁观音茶叶则是乌龙茶类的杰出代表。铁观音,茶人又称红心观音、红样观音;铁观音茶叶是一种乌龙茶,其茶树名也叫铁观音,成品茶叶同样称为铁观音。铁观音茶叶不仅香高味醇,是天然可口佳饮,而且养生保健功能在诸多茶叶中也属佼佼者。科学研究表明,安溪铁观音除了具有一般茶叶的保健功能外,还具有抗衰老、抗癌症、抗动脉硬化、防治糖尿病、减肥健美、防治龋齿、清热降火,敌烟醒酒等功效。以安溪铁观音为代表的福建乌龙茶介于绿茶和红茶之间,属于半发酵茶类。铁观音冲泡后汤色金黄浓艳似琥珀,有天然馥郁的兰花香,滋味醇厚甘鲜,回甘悠久,俗称有“音韵”。铁观音茶香高而持久,可谓“七泡有余香”。目前我国乌龙茶有闽南、闽北、广东、台湾等四大产区,以福建产制历史最长,产量最多,品质最好,尤以安溪铁观音和武夷岩茶闻名于海内外。
  安溪铁观音制作严谨,技艺精巧。3月下旬萌芽,一年分四季采制,谷雨至立夏为春茶;夏至至小暑为夏茶;立秋至处暑为暑茶;秋分至寒露为秋茶。有个别地方由于气温较高,还可生产一季冬茶,冬茶颜色较青绿,滋味也较青,产量不多。制茶品质以秋茶为最好,春茶次之。秋茶的香气特高,俗称秋香,但汤味较薄。夏、暑茶品质较次。

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